Ako pripraviť mikroskopické preparáty

Tom Grill / Getty Images

Mokré držiaky sa používajú na živé vzorky, priehľadné kvapaliny a vodné vzorky. Mokrá hora je ako sendvič. Spodná vrstva je sklíčko. Ďalej je vzorka kvapaliny. Malý štvorec číreho skla alebo plastu (krycie sklíčko) sa umiestni na vrch kvapaliny, aby sa minimalizovalo odparovanie a chránila šošovka mikroskopu pred vystavením vzorke.

Príprava mokrej montáže pomocou plochého sklíčka alebo podložného sklíčka:

1. Umiestnite kvapku tekutiny do stredu podložného sklíčka (napr. vodu, glycerín, imerzný olej alebo tekutú vzorku).
2. Ak si prezeráte vzorku, ktorá ešte nie je v kvapaline, pomocou pinzety umiestnite vzorku do kvapky.
3. Umiestnite jednu stranu krycieho sklíčka pod uhlom tak, aby sa jeho okraj dotýkal podložného sklíčka a vonkajšieho okraja kvapky.
4. Pomaly sklopte krycie sklíčko, aby ste sa vyhli vzduchovým bublinám. Väčšina problémov so vzduchovými bublinami pochádza z nepriloženia krycieho sklíčka pod uhlom, nedotýkania sa kvapky tekutiny alebo z používania viskózna (hustá) kvapalina. Ak je kvapka tekutiny príliš veľká, krycie sklíčko bude plávať na podložnom sklíčku, čo sťaží zaostrenie na objekt pomocou mikroskopu.

Niektoré živé organizmy sa pohybujú príliš rýchlo na to, aby ich bolo možné pozorovať na mokrom vrchu. Jedným z riešení je pridať kvapku komerčného prípravku nazývaného „Proto Slow“. Pred priložením krycieho sklíčka sa kvapka roztoku pridá do kvapky kvapaliny.

Niektoré organizmy (napr Paramecium ) potrebujú viac priestoru, než aký sa tvorí medzi krycím sklíčkom a plochým sklíčkom. Pridaním niekoľkých pramienkov bavlny z vreckovky alebo tampónu alebo pridaním malých kúskov rozbitého krycieho sklíčka pridáte priestor a „uchováte“ organizmy.

Keď sa kvapalina vyparí z okrajov podložného sklíčka, živé vzorky môžu zomrieť. Jedným zo spôsobov, ako spomaliť odparovanie, je použiť špáradlo na potiahnutie okrajov krycieho sklíčka tenkým okrajom vazelína pred priložením krycieho sklíčka na vzorku. Jemne zatlačte na krycie sklíčko, aby ste odstránili vzduchové bubliny a utesnili sklíčko.

02 z 05

Dry Mount Slides

Wladimir Bulgar / Science Photo Library / Getty Images

Suché sklíčka môžu pozostávať zo vzorky umiestnenej na podložnom sklíčku alebo vzorky pokrytej krycím sklíčkom. Pre mikroskop s nízkym výkonom, akým je napríklad disekčný ďalekohľad, nie je veľkosť objektu kritická, pretože sa bude skúmať jeho povrch. Pre zložený mikroskop musí byť vzorka veľmi tenká a čo najrovnejšia. Zamerajte sa na jednu bunka hrúbka na niekoľko buniek. Na oholenie časti vzorky môže byť potrebné použiť nôž alebo žiletku.

1. Položte sklíčko na rovný povrch.
2. Pomocou pinzety alebo pinzety umiestnite vzorku na sklíčko.
3. Umiestnite krycie sklíčko na vrch vzorky. V niektorých prípadoch je v poriadku prezerať si vzorku bez krycieho sklíčka, pokiaľ dbáte na to, aby ste nenarazili vzorku do šošovky mikroskopu. Ak je vzorka mäkká, môže sa vytvoriť „squash slide“. jemne zatlačením na krycie sklíčko.

Ak vzorka nezostane na podložnom sklíčku, možno ju zaistiť natretím podložného sklíčka čírym lakom na nechty bezprostredne pred pridaním vzorky. To tiež robí šmykľavku semipermanentnou. Zvyčajne je možné sklíčka opláchnuť a znova použiť, ale použitie laku na nechty znamená, že sklíčka sa musia pred opätovným použitím očistiť odlakovačom.

03 z 05

Ako urobiť sklíčko s krvným náterom

Arindam Ghosh / Getty Images

Niektoré kvapaliny sú buď príliš sýto sfarbené alebo príliš husté na to, aby ich bolo možné vidieť pomocou techniky mokrého pripevnenia. Krv a sperma sa pripravujú ako nátery. Rovnomerné rozmazanie vzorky po sklíčku umožňuje rozlíšiť jednotlivé bunky. Zatiaľ čo vytvorenie rozmazania nie je zložité, dosiahnutie rovnomernej vrstvy vyžaduje cvik.

1. Umiestnite malú kvapku tekutej vzorky na sklíčko.
2. Vezmite druhú čistú snímku. Držte ho pod uhlom k prvej snímke. Pomocou okraja tohto sklíčka sa dotknite kvapky. Kapilárne pôsobenie natiahne kvapalinu do čiary, kde sa plochý okraj druhého sklíčka dotýka prvého sklíčka. Rovnomerne nakreslite druhé sklíčko po povrchu prvého sklíčka, čím vytvoríte šmuhu. Nie je potrebné vyvíjať tlak.
3. V tomto bode buď nechajte sklíčko zaschnúť, aby sa dalo zafarbiť, alebo na škvrnu položte krycie sklíčko.

04 z 05

Ako farbiť diapozitívy

MaXPdia / Getty Images

Existuje mnoho spôsobov farbenia sklíčok. Škvrny uľahčujú videnie detailov, ktoré by inak mohli byť neviditeľné.

Jednoduché škvrny zahŕňajú jód, krištáľová fialová alebo metylénová modrá. Tieto riešenia možno použiť na zvýšenie kontrastu v mokrých alebo suchých montážach. Ak chcete použiť jednu z týchto škvŕn:

1. Pripravte si mokrú alebo suchú montáž s krycím sklíčkom.
2. Pridajte malú kvapku škvrny na okraj krycieho sklíčka.
3. Položte okraj vreckovky alebo papierovej utierky na opačný okraj krycieho sklíčka. Kapilárne pôsobenie potiahne farbivo cez sklíčko, aby sa vzorka zafarbila.

05 z 05

Bežné predmety na skúmanie mikroskopom

Carol Yepes / Getty Images

Mnohé bežné jedlá a predmety tvoria fascinujúce námety na diapozitívy. Mokré šmýkačky sú najlepšie pre jedlo. Suché sklíčka sú dobré pre suché chemikálie. Príklady vhodných predmetov zahŕňajú:

• Stolová soľ
• Epsom Salt
• Kamenec
• Prášok na umývanie riadu
• Cukor
• Pleseň z chleba alebo ovocia
• Tenké plátky ovocia alebo zeleniny
• Ľudské alebo zvieracie vlasy
• Jazierková voda
• Záhradná pôda (ako mokrý vrch)
• Jogurt
• Prach